鬼筆環肽(phalloidin),是從一種劇毒磨菇(Amanita phalloides)中分離出來的一種無色多肽物質,屬于毒傘肽類毒素,是一種強烈毒素。其毒性之烈,曾經讓人類聞風喪膽。但是科學家卻在短短數十年時間之內對它進行了深入了解,并且對其毒性進行合理利用,使其在科研舞臺上發揮出重要的內在價值。
鬼筆環肽在自然界中通常與鵝膏毒堿(amanitin)一起存在,毒性比鵝膏毒堿弱,對小鼠的致死劑量是50微克,對人體也有很強的毒性,可引起流涎、嘔吐、便血、發紺、痙攣、肌肉攣縮,以致死亡。它同細胞松弛素B的作用相反, 只與聚合的微絲結合, 而不與肌動蛋白單體分子結合。
它同聚合的微絲結合后, 抑制了微絲的解體, 因而破壞了微絲的聚合和解聚的動態平衡。通過讓這種毒素連接于熒光染料上面,研究人員可以研究細胞的內部工作機制,窺視細胞如何分裂。通過這些觀察,他們可以揭開癌癥工作機制和組織生長之謎。
美國加州大學圣克魯斯分校的兩位化學家斯科特·洛基和勞拉·舒利斯科(Laura Schuresko)利用一種稱為固相合成(solid-phase synthesis)的手法,制造出了鬼筆環肽的類似物質谷氨酸7-鬼筆環肽(Glu7-Phalloidin)。另一位科學家(Anderson MO)合成出了鬼筆環肽的另一類似物質丙氨酸7-鬼筆環肽(Ala7-Phalloidin)。
美國多肽公司(American Peptide Company, USA)的研究人員劉寶生(Baosheng Liu)和張建恒(Jianheng zhang)利用固相合成和液相合成相結合的方法成功合成出了鬼筆環肽。用化學法合成的鬼筆環肽其物理和化學性質與從毒蘑菇中提取的天然鬼筆環肽一致 。
FITC和Rhodamin等熒光物質標記的鬼筆環肽可特異的與真核細胞的F-actin結合,從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。
根據這個原理,Abbkine公司的研發人員設計出了一系列鬼筆環肽產品,提供多款不同熒光基團標記的鬼筆環肽,可以滿足您多標實驗的不同需求。他們使用方便,價格合理,詳情請參考以下表格:
品名 | 貨號(鏈接) |
AbFluor™ 488-Phalloidin | BMD00082 |
AbFluor™ 555-Phalloidin | BMD00083 |
AbFluor™ 594-Phalloidin | BMD00084 |
TraKine™ F-actin Staining Kit (Green Fluorescence) | KTC4008 |
TraKine™ F-actin Staining Kit (Orange Fluorescence) | KTC4009 |
鬼筆環肽染色相對于熒光抗體的優勢如下:
(1)親和力高:Kd= 20 nM;
(2)特異性強:選擇性結合于絲狀肌動蛋白F-actin,而不會與單體肌動蛋白G-actin結合;
(3)優于抗體染色:鬼筆環肽無物種限制,且幾乎不存在非特異性染色,染色區和非染色區域對比性極其明顯;
(4)靈敏度高:納摩爾濃度(nM)染色即可滿足實驗要求;
(5)鬼筆環肽衍生物很小,直徑約12-15Å,分子量<2000 Da;
(6)適用范圍廣:無物種差異性;同樣適用于甲醛固定和打孔處理后的組織樣本。
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